Резюме отчета о проведении биологических испытаний дезинфицирующего средства Вирубой

Резюме отчета о проведении биологических испытаний дезинфицирующего средства Вирубой

15.04.2020
Категория: полезное

Summary of Biological Test Report of Viruboy Disinfectant

Е. С. Богданова, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник группы биотехнологии и методов геномного редактирования Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт общей генетики им. Н.И. Вавилова Российской академии наук

E. S. Bogdanova, doctor of biological sciences, senior researcher of group of biotechnology and genomic editing methods Federal State Budgetary Institution of Science N.I. Vavilova Russian Academy of Sciences

В.Ю. Ломакин, кандидат химических наук, зам. генерального директора по производству ООО «ВЕТОС-ФАРМА»

V.Yu. Lomakin, doctor of chemical sciences, vice general director for production, VETOS-PHARMA

Аннотация: Проводились исследования эффективности бактерицидного действия дезинфицирующего средства «Вирубой»в отношении модельных микроорганизмов Escherichia coli (грам-отрицательная бактерия), Bacillus anthracis (спорообразующая грам-положительная бактерия) и Yarrowia lipolytica (дрожжеподобный гриб-аскомицет) методом бактериологического высева.

Оценка кинетики бактерицидного действия дезинфицирующего средства«Вирубой» при концентрациях рабочих растворов 0,1% и 0,3%, с регистрацией сигнала биолюминесценции в реальном времени.

Studies were conducted on the effectiveness of the bactericidal action of the Viruboy disinfectant in relation to model microorganisms Escherichia coli (gram-negative bacterium), Bacillus anthracis (spore-forming gram-positive bacterium) and Yarrowia lipolytica (yeast-like ascomycete fungus) by bacteriological seeding.

Assessment of the kinetics of the bactericidal action of the Viruboy disinfectant at concentrations of working solutions of 0.1% and 0.3%, with real-time recording of the bioluminescence signal.

Ключевые слова: дезинфицирующее средство, бактерицидное действие, фунгицидное действие, микроорганизмы, эффективная концентрация, повышенная устойчивость

Key words: disinfectant, bactericidal effect, fungicidal effect, microorganisms, effective concentration, increased resistance

В июле 2019 г на базе группы биотехнологии и методов геномного редактирования института общей генетики имени Н.И. Вавилова РАН были проведены испытания бактерицидного и фунгицидного действия дезинфицирующего средства Вирубой в сравнении с аналогами Х1 и Х2.

Несмотря на сходный химический состав всех испытуемых дезсредств, основным компонентом которых является глутаровый альдегид, их активность в отношении тест-объектов –Escherichia coli (грам-отрицательная бактерия), Bacillus anthracis (спорообразующая грам-положительная бактерия) и Yarrowia lipolytica (дрожжеподобный гриб-аскомицет) были выявлены существенные различия.

Проведенные испытания дезсредства Вирубой, Х1 и Х2 в отношении всех выбранных тест-объектов показали, что при использовании в концентрациях 0,2% или 0,3%, рекомендуемых большинством производителей, присутствующих на рынке РФ, эти дезсредства способны гарантированно уничтожать микроорганизмы любых таксономических групп, в том числе, патогенов 2-ой группы. Стерилизация достигается и при обработке шероховатых поверхностей, загрязненных белком. В то же время, при сравнении дезсредств по показателю минимальной эффективной концентрации, уничтожающей все микроорганизмы, было установлено, что средство Вирубой существенно превосходит аналоги: Х1 и Х2.

Так, например, результаты проведённого исследования показали, что полная гибель E. coli при обработке средством Вирубой достигается при концентрации 0,02% уже через 15 мин обработки.

По этому параметру средство Вирубой оказалось наиболее действенным среди всех испытанных дезсредств. Полностью эффективная концентрация средства Х2 для E. coli составила 0,04%. Средство Х1 существенно уступало по эффективности действия двум другим средствам, участвовавшим в испытаниях. Его минимальная эффективная концентрация для E. coli составила 0,16% (в 4 раза больше, чем у средства Вирубой). При этом при концентрации 0,08% средство Х1 через 15 мин инкубации не оказывало видимого эффекта на жизнеспособность тест-культуры, а после инкубации в этой концентрации в течение 2,5 часов вызывало появление популяции бактерий с повышенной устойчивостью к дезсредству, характеризующихся медленным ростом.

Результаты испытаний дезсредств в отношении грам-положительной бактерии B. anthracis (вакцинный штамм возбудителя сибирской язвы) в целом незначительно отличались от результатов, полученных на E. coli, за исключением следующих пунктов:

— В случае B. anthracis эффективная концентрация средства Вирубой составила 0,01%. Средство Х2 при инкубации в течение 15 мин в 2 раза уступало по концентрационной эффективности средству Вирубой, хотя при длительной инкубации в течение 150 мин эффективные концентрации Х2 и средства Вирубой в отношении B. anthracis выравнивались и становились равными 0,02%.

— Дезсредство Х1 существенно проигрывало Х2 и средству Вирубой, поскольку его эффективная концентрация в отношении B. anthracis при инкубации в течение 15 мин составляла 0,16%, а при инкубации в течение 150 мин – 0,08%. При инкубации B. anthracis с Х1 в течение 15 мин при концентрации 0,08% наблюдалось появление популяции медленно растущих клеток с повышенной устойчивостью к дезсредствам.

Антимикробная активность средства Вирубой при минимальных концентрациях рабочего раствора подтверждается также результатами его испытаний, проведёнными ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр вирусологии и микробиологии». Результаты представлены в табл.1.

Таблица 1. Антимикробная активность средства Вирубой в отношении условно патогенных микроорганизмов E. coli (штамм К-12) и S. aureus (шт 209-Р)

Примечание: 1 – 0,5 %; 2 – 0,25 %; 3 – 0,125; 4 – 0,0625; 5 – 0,0312; 6 – 0,0156; 7 – 0,0078; 8 – 0,0039; 9 – 0,0019; 10 – 0,0009;
— — роста нет;
+ — рост есть

Существенным результатом испытаний является обнаружение способности дезсредств при использовании в низких концентраций, не вызывающих полной гибели микроорганизмов,стимулировать образование медленно растущих культур бактерий, характеризующихся повышенной устойчивостью к использованным средствам при повторной обработке. Это явление наблюдалось при обработке культуры E. сoli средством Х1 в концентрации 0,08% в течение 150 мин, а также средством Х2 в концентрации 0,02% также в течение 150 мин. Аналогичный эффект наблюдался при обработке средством Х1 В. anthracis в течение 15 мин. При обработке указанных культур средством Вирубой в низких концентрациях не обнаружено культур бактерий с повышенной устойчивостью к данному средству.

В случае дрожжей Y. lipolytica, в отличие от бактерий,образования клонов с повышенной устойчивостью не происходило. Наблюдение подтверждает высокую физиологическую лабильность микроорганизмов. На практике борьба с возникновением устойчивых к обработке микроорганизмов требует использования средств в концентрациях, хотя бы в 4-8 раз превышающих минимально эффективную. С этой точки зрения использование средства Вирубой в рекомендованных дозировках имеет очевидное преимущество перед средствами Х1 и Х2, наиболее представленными на рынке РФ.